Rien ne prédestinait la famille Winchester à basculer dans l'enfer en cette nuit du 2 nowembre 1983. Cette nuit là , comme toutes les autres , MAry et John Winchester s'apprêtent à coucher leur deux fils Dean (âgé de 4 ans) et Sam ( 6 mois ce jour-là). Après les avoir couchés , elle s'en va également se coucher. Dans la nuit , alertée par les pleurs de Sam , Mary se lève et se rend dans sa chambre ,elle aperçoit un homme debout près du berceau et croit que c'est John ,elle quitte alors la chambre rassurée. En retournant dans le couloir , le son de la télé l'interpelle ,elle descend donc pour l'éteindre ,mais elle est surprise de voir que c'est John qui s'est endormi devant. Prenant conscience que quelqu'un s'est introduit chez eux elle court dans la chambre de Sam . En entendant sa femme hurler John se lève et court voir ce qu'il se passe en haut. Mais apparemment il ne s'est rien passé , car Mary n'est pas dans la chambre , John s'approche du lit de Sam , puis des gouttes de sang tombent sur sa couverture , John lève les yeux au ciel et voit sa femme collée au plafond , le bas-ventre ouvert. Puis subitement Mary prend feu . Effrayé par les cris Dean débarque et John lui demande d'emmener Sam dehors le plus vite possible et de l'attendre. John tente de sauver sa femme , mais il doit sortir , la pièce explose alors qu'il arrive dehors.
22 plus tard, suite a une violente dispute avec son père, Sam a coupé les ponts avec John et Dean , car il ne supporte plus la chasse et le rythme de vie que leur père leur impose. Depuis quatre ans et vit à l'université avec sa petite amie Jessica Moore. Une nuit, Dean revient dans sa vie pour lui demander de l'aide car John a disparu depuis des semaines alors qu'il était en train de chasser un mauvais esprit. Quelques jours plus tard, pendant que Sam dort, le Démon au yeux jaunes revient et tue Jessica. Sam décide de suivre Dean pour retrouver leur père et traquer le Démon aux yeux jaunes pour se venger, mais le Démon sera dur à trouver et à détruire.
Durant leur périple sur les routes des États-Unis à la recherche de leur père et du démon, Sam et Dean viennent en aide aux habitants des grandes ou petites villes qui sont victimes des créatures des légendes urbaines : vampires, fantômes, psychopathes, démons, sectes, loups-garous, zombies, etc.